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教您幾個(gè)小貼士幫您更好使用Elisa試劑盒點(diǎn)擊次數(shù):1013 更新時(shí)間:2022-06-24

  Elisa試劑盒是抗原或抗體的固相化及抗原或抗體的酶標(biāo)記。結(jié)合在固相載體表面的抗原或抗體仍保持其免疫學(xué)活性,酶標(biāo)記的抗原或抗體既保留其免疫學(xué)活性,又保留酶的活性。在測(cè)定時(shí),受檢標(biāo)本(測(cè)定其中的抗體或抗原)與固相載體表面的抗原或抗體起反應(yīng)。用洗滌的方法使固相載體上形成的抗原抗體復(fù)合物與液體中的其他物質(zhì)分開(kāi)。再加入酶標(biāo)記的抗原或抗體,也通過(guò)反應(yīng)而結(jié)合在固相載體上。此時(shí)固相上的酶量與標(biāo)本中受檢物質(zhì)的量呈一定的比例。加入酶反應(yīng)的底物后,底物被酶催化成為有色產(chǎn)物,產(chǎn)物的量與標(biāo)本中受檢物質(zhì)的量直接相關(guān),故可根據(jù)呈色的深淺進(jìn)行定性或定量分析。由于酶的催化效率很高,間接地放大了免疫反應(yīng)的結(jié)果,使測(cè)定方法達(dá)到很高的敏感度。 ELISA可用于測(cè)定抗原,也可用于測(cè)定抗體。
 
  Elisa試劑盒的使用小貼士:
 
  一、溫度
 
  1.試劑盒回溫
 
  大多數(shù)ELISA檢測(cè)試劑盒為冷藏(2℃-8℃)保存。從冰箱拿出來(lái)后,先不要急于打開(kāi)試劑盒,要等試劑盒的溫度平衡至室溫且試劑盒盒表面無(wú)冷凝水。檢測(cè)所用的試劑需充分混勻且*溶解后再用。
 
  Tips:提前1~2小時(shí)取出試劑盒,放在室溫中;或在預(yù)設(shè)25℃恒溫培養(yǎng)箱中平衡30分鐘~60分鐘。
 
  2.環(huán)境溫度的控制
 
  實(shí)驗(yàn)室可采用以下措施控制溫度:
 
  1)實(shí)驗(yàn)室應(yīng)配備溫濕度表,且確保定期計(jì)量。
 
  2)根據(jù)天氣情況設(shè)定實(shí)驗(yàn)室空調(diào)制冷或加溫功能,待室溫穩(wěn)定且無(wú)干擾的條件下再開(kāi)始檢測(cè)流程。
 
  3)選用帶溫控裝置的孵育儀器,如恒溫孵育器、恒溫培養(yǎng)箱、多功能酶標(biāo)儀等。注意要提前開(kāi)啟預(yù)熱。
 
  Tips:大多數(shù)試劑盒加樣后反應(yīng)時(shí)間較短,環(huán)境溫度對(duì)檢測(cè)結(jié)果會(huì)有很大影響,所以控制好環(huán)境溫度是保證試劑盒檢測(cè)結(jié)果有效的重要因素。
 
  3.孵育
 
  孵育時(shí)要保證溫度均勻,防止揮發(fā)變干。孵育時(shí)使用封板膜,并置于暗處孵育。多塊板一起實(shí)驗(yàn)時(shí),要平放各板,不要疊放,避免溫度擴(kuò)散的不均勻性或邊緣效應(yīng)。
 
  二、剩余試劑的妥善保存
 
  試劑盒恢復(fù)至室溫后,取出要使用的酶標(biāo)板孔,未使用的酶標(biāo)板孔應(yīng)及時(shí)放回鋁箔袋,加入干燥劑,封緊封口,2℃-8℃冷藏保存。
 
  Tips:切忌將未*平衡至室溫的酶標(biāo)板放回鋁箔袋,因?yàn)榇藭r(shí)由于溫度差,酶標(biāo)板上會(huì)有水汽,不利于穩(wěn)定保存。
 
  三、加樣
 
  1.加樣要快速準(zhǔn)確,時(shí)間宜控制在15分鐘內(nèi)。
 
  2.如樣品量較大,可分次完成實(shí)驗(yàn),或?qū)y(cè)樣液置于預(yù)混微孔板中使用多通道移液器快速移取。
 
  3.吸取同一試劑,可將試劑倒入V型加樣槽中,使用多通道移液器快速移取。
 
  Tips:在加樣槽上套上一次性PE手套,再倒入檢測(cè)用試劑,可以保證試劑完整性且不被污染。加樣槽更換一次性手套后可繼續(xù)下一種試劑的使用。
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